抗CD3CD28免疫磁珠活化T细胞条件优化

　　

为优化抗CD3/CD28免疫磁珠的制备条件及T细胞活化培养参数，提高T细胞活化效率及扩增倍数，采用EDC/NHS法将抗CD3、抗CD28抗体偶联至羧基磁珠，调整T细胞与磁珠共培养比例，并以流式细胞术检测活化标志CD25/CD69阳性率，采用细胞计数法评估扩增倍数。结果表明，当抗CD3和抗CD28偶联剂量分别为22、15 μg，磁珠粒径为4.5 μm，抗CD3克隆号为UCHT-1，T细胞与磁珠比例为1∶1时，CD25/CD69阳性率达87.5%±2.4%，10 d扩增倍数为84.1±5.6，显著优于其他组合（P<0.05）。经系统优化后，抗CD3/CD28免疫磁珠可高效活化并扩增人T细胞，为CAR-T细胞制备提供了可靠的技术方案。

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